由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體,稱(chēng)為單克隆抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原表位的特異性抗體即單克隆抗體。
凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù),是六十年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便,不需要有機(jī)溶劑,對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱(chēng)分子排阻色譜法。
BCA(Bicinchoninic Acid)法是一種常用的蛋白定量檢測(cè)方法,其原理是利用蛋白質(zhì)與銅離子在堿性溶液中發(fā)生絡(luò)合反應(yīng),生成穩(wěn)定的紫紅色復(fù)合物,再與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較,即可求出待測(cè)蛋白的濃度。該方法具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、操作簡(jiǎn)便、抗干擾能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)等領(lǐng)域。
凝膠滲透色譜GPC(Gel Permeation Chromatography)也稱(chēng)作體積排斥色譜[SEC(Size Exclusion Chromatography)]是用溶劑作流動(dòng)相,流經(jīng)多孔填料(如多孔硅膠或多孔樹(shù)脂)作為分離介質(zhì)的液相色譜法。
避免反復(fù)凍融,這會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷和標(biāo)志物表達(dá)改變。保存過(guò)程中要注意無(wú)菌操作,防止樣本污染。
用于白色念珠菌分離和鑒定:念珠菌顯色培養(yǎng)基根據(jù)酶底物法,通過(guò)顯色來(lái)區(qū)別不同念珠菌,25-28℃培養(yǎng)48小時(shí)后,白色念球菌顯藍(lán)綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
細(xì)胞凋亡的生化改變不僅僅是DNA的有控降解,在細(xì)胞凋亡的過(guò)程中往往還有新的基因的表達(dá)和某些生物大分子的合成作為調(diào)控因子.如我們實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)的TFAR-19就是在細(xì)胞凋亡時(shí)高表達(dá)一種分子,再如在糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)鼠胸腺細(xì)胞凋亡過(guò)程中,加入RNA合成抑制劑或蛋白質(zhì)合成抑制劑即能抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生.
植物患病組織內(nèi)的真菌菌絲體,如果給予適宜的環(huán)境條件,除個(gè)別種類(lèi)外,一般都能恢復(fù)生長(zhǎng)和繁殖。植物病原菌的分離就是指通過(guò)人工培養(yǎng),從染病植物組織中將病原真菌與其它雜菌相分開(kāi),并從寄主植物中分離出來(lái),再將分離到的病原菌于適宜環(huán)境內(nèi)純化,這個(gè)過(guò)程總稱(chēng)植物病菌的分離培養(yǎng)。植物病原真菌的分離一般都是采用組織分離法,就是切取小塊病組織,經(jīng)表面消毒和滅菌水洗過(guò)后,移到人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
?一抗和二抗的種屬來(lái)源通常是一樣的?。在選擇二抗時(shí),通常需要根據(jù)一抗的種屬來(lái)源來(lái)選擇相應(yīng)的二抗。例如,如果一抗是小鼠源的單克隆抗體,那么二抗應(yīng)選擇抗小鼠的二抗(如山羊抗小鼠或兔抗小鼠)。?