細胞樣本在流式細胞儀分選后,保存和處理方法如下:
保存方法:
短期保存(數(shù)小時至數(shù)天):
置于4℃冰箱:在含有適當培養(yǎng)基和血清的條件下,可保存較短時間,但細胞活性可能會逐漸下降。
可添加細胞保護劑,如DMSO(二甲基亞砜),但需注意其濃度和對細胞的影響。
長期保存(數(shù)周、數(shù)月甚至數(shù)年):
液氮凍存:將細胞懸浮在含有冷凍保護劑(如10%DMSO和90%胎牛血清)的培養(yǎng)基中,逐步降溫至-80℃,然后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
處理方法:
繼續(xù)培養(yǎng):
如果細胞活性良好,可將分選后的細胞接種到新的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中,在合適的培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)。
定期觀察細胞狀態(tài),監(jiān)測細胞生長和增殖情況。
實驗分析:
提取DNA、RNA或蛋白質(zhì)進行分子生物學分析,如PCR、測序、Western blot等。
進行細胞功能實驗,如增殖實驗、遷移實驗、凋亡檢測等。
細胞固定:
若要進行免疫熒光染色等形態(tài)學觀察,可以使用多聚甲醛等固定劑對細胞進行固定。
在保存和處理分選后的細胞時,要始終注意無菌操作,避免細胞污染,同時根據(jù)具體的實驗需求和細胞特性選擇合適的方法。